干扰素调节因子-1调控P38 MAPK信号通路参与小鼠肝缺血再灌注损伤

• 作者: 于瑶 何金丹 喻文立 张海明 朱志军 李世朋 杜洪印 王振
• 来源期刊: 中华器官移植杂志
• 关键词: 小鼠 肝 再灌注损伤 干扰素调节因子-1 P38 MAPK
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 362-367
• 页数: 6页
• 字数: 4282字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-1785.2016.06.010

摘要

目的 探讨干扰素调节因子-1 (IRF-1)调控P38 MAPK信号通路对小鼠肝缺血再灌注损伤(IRI)的影响及其机制.方法 采用随机数字表法将C57BL/6小鼠分为4组,每组10只,建立小鼠肝IRI模型.(1)Ad-GFP组:在建立肝IRI模型前(术前)6h经小鼠尾静脉注射GFP对照病毒液40μl;(2) Ad-IRF-1组:于术前6h注射高表达IRF1的病毒液40 μl;(3)Ad-IRF-1+ SB203580组(实验组):于术前6h注射高表达IRF-1的病毒液40μl,同时经腹腔注射SB203580 2 mg/kg;(4)对照组:于术前6h注射等体积生理盐水.检测各组小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)的变化,HE染色观察肝组织病理学改变,TUNEL法检测肝细胞凋亡情况,免疫组织化学染色法检测肝组织PCNA的表达情况.用AML 12细胞建立模拟IRI模型.将细胞分为对照组、GFP-NC组、GFP-IRF-1组、siRNA-NC组和IRF-1 siRNA组.采用蛋白质印迹法检测IRF-1、P38、p-P38、Caspase-3蛋白的表达.结果 与Ad-GFP组相比,Ad-IRF-1组小鼠血清ALT和AST升高(P＜0.05);病理学检查见肝细胞肿胀,肝窦狭窄,片状坏死及红细胞淤积,肝组织结构破坏严重;肝细胞凋亡率增高(P＜0.05);PCNA呈弱表达或不表达.实验组较Ad-IRF-1组肝损伤减轻,肝细胞凋亡减少(P＜0.05),PCNA表达增多.此外,GFP-IRF-1组AML12细胞的IRF-1、p-P38、Caspase-3蛋白表达水平明显高于GFP-NC组(P＜0.05);IRF-1 siRNA组的IRF-1、p-P38、Caspase-3蛋白表达水平明显低于siRNA-NC组(P＜0.05).结论 IRF-1的表达增加加重了小鼠肝脏的IRI,其机制可能与IRF-1激活P38 MAPK通路,进而加重肝细胞凋亡有关.抑制IRF-1表达或P38活性能够减轻小鼠肝脏的IRI.