猴源溶组织内阿米巴原虫巢式PCR检测方法的建立

• 作者: 刘浩 李文超 汪凯 顾有方
• 来源期刊: 安徽科技学院学
• 学科: 农学
• 关键词: 溶组织内阿米巴原虫 猴 巢式PCR 检测
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 10-13
• 页数: 4页
• 分类号: S855.9
• 字数: 3133字
• 语种: 中文

摘要

目的：建立猴源溶组织内阿米巴原虫巢式PCR 检测方法并初步应用于临床检测；方法：根据溶组织内阿米巴原虫16S rDNA基因序列，设计1对阿米巴属原虫保守引物和1对溶组织内阿米巴原虫特异性引物，建立猴源溶组织内阿米巴原虫巢式PCR检测方法，摸索出了该检测方法的最佳反应条件，进了行特异性和敏感性试验，并对96份猕猴粪便样品进行检测；结果：该巢式PCR方法能特异性地扩增出猴源溶组织内阿米巴原虫目的片段，与莫氏内阿米巴、波氏内阿米巴、迪斯帕内阿米巴、大肠内阿米巴、微小隐孢子虫等11种相关原虫基因组DNA无交叉反应；最低能检测到0．3 fg的阳性参照DNA；对临床样品检测结果表明该PCR技术检查阳性者显微镜检查均为阳性；结论：建立的巢式PCR方法具有高度的特异性和敏感性，对于溶组织内阿米巴原虫病的诊断和流行病学调查具有重要的应用价值。