应用实时荧光RT-PCR检测柑橘黄化脉明病毒

• 作者: 周常勇 周彦 李中安 杨秀燕 王雪峰 陈洪明
• 来源期刊: 园艺学报
• 学科: 农学
• 关键词: 柑橘 柑橘黄化脉明病毒 实时荧光RT-PCR 检测 应用
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 方法
• 页码范围: 168-174
• 分类号: S666
• 语种: 中文
• DOI: 10.16420/j.issn.0513-353x.2015-0774

摘要

为更快速准确检测柑橘黄化脉明病毒(Citrus yellow vein clearing virus,CYVCV),根据病毒外壳蛋白基因的保守序列设计特异性引物,通过体系优化得到最佳反应条件,建立基于SYBR Green Ⅰ的CYVCV实时荧光RT-PCR检测方法.该方法可特异性检测CYVCV,而测试的柑橘衰退病毒、碎叶病毒等5种柑橘病毒均不能检测出.灵敏度较普通RT-PCR提高了100倍,标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,扩增效率和相关性系数分别为102％和0.999.对田间样品的检测结果表明,建立的实时荧光RT-PCR适用于检测不同柑橘品种中CYVCV的含量.