山楂属植物中苹果褪绿叶斑病毒的RT-PCR检测及病毒脱除方法

• 作者: 代红艳 李晓明 郑文燕 郭巍 马跃
• 来源期刊: 果树学报
• 学科: 农学
• 关键词: 山楂 苹果褪绿叶斑病毒 RT-PCR 组培 脱毒
• 年，卷（期）: 2016,（12）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 1576-1583
• 页数: 8页
• 分类号: S661.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.13925/j.cnki.gsxb.20160349

摘要

[目的]建立优化的山楂属植物苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)的RT-PCR检测体系,获得以山楂组培苗为试材的高效ACLSV脱除方法.[方法]基于转录组高通量测序解析的山楂属植物ACLSV基因组序列设计病毒检测引物,比较cDNA模板浓度、Taq DNA聚合酶种类及采样部位对病毒RT-PCR检测效果的影响.通过组培苗热处理和培养基中添加三氮唑核苷来脱除山楂植株中的ACLSV.[结果]基于转录组高通量测序获得的2个ACLSV山楂分离物的全基因组序列设计并筛选出适合于山楂属植物ACLSV的RT-PCR检测引物.建立了优化的山楂属植物ACLSV的RT-PCR检测体系.对80份山楂样品进行病毒检测,其中有18个样本检测出ACLSV,带毒率为22.5％.比较了热处理(37℃、30d)、化学处理(培养基中添加20 mg·L-1的三氮唑核苷,处理40 d)、热处理与化学处理结合方法(处理30d)3种方法对山楂组培苗中ACLSV的脱除效率,表明热处理或热处理与化学处理结合的方法能够完全脱除山楂中的ACLSV,而单独化学处理的脱毒率不能达到100％.[结论]建立了优化的山楂属植物ACLSV的RT-PCR检测体系,表明组培苗热处理是脱除山楂植株中ACLSV的有效方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	代红艳		45	577	14.0	23.0
2	马跃		31	184	8.0	12.0
3	郭巍		5	44	3.0	5.0
4	李晓明		18	55	5.0	7.0
5	郑文燕		1	0	0.0	0.0