新型BCA中基于实时荧光定量PCR的条形码DNA定量方法的建立

• 作者: 姬长甫 尹惠琼 朱凤宣 杨姝 王蕊 章金刚 贾俊婷
• 来源期刊: 临床输血与检验
• 学科: 医学
• 关键词: 条形码DNA 实时荧光定量PCR 新型BCA检测
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 实验技术与方法
• 页码范围: 258-262
• 页数: 5页
• 分类号: R446.11|R392.11
• 字数: 2973字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-2587.2016.03.019

摘要

目的 建立条形码DNA实时荧光定量PCR (qPCR)的定量方法,为人源血液病毒蛋白的新型BCA检测奠定基础.方法 在新型BCA检测中,设计并合成了一段条形码DNA序列及其引物和探针序列.将条形码DNA克隆人pMD-18T载体,构建条形码DNA参考品质粒.优化条形码DNA qPCR检测体系的重要反应参数,以一系列梯度稀释的条形码DNA参考品质粒为模板,建立qPCR标准曲线,对建立的条形码DNA qPCR定量方法进行敏感性和重复性评价.结果 获得了一段特异的条形码DNA序列并构建其参考品质粒,建立了条形码DNA qPCR的定量方法,检测标准曲线在(109～102) copies/μl模板浓度范围内线性关系良好,检测灵敏度达100 copies/μ l,组内重复的变异系数均小于10％,组间重复的变异系数范围4.42 ％～39.05％.结论 建立的基于实时荧光定量PCR的条形码DNA定量方法具有较高的灵敏度和良好的重复性,可用于人源血液病毒蛋白的新型BCA检测体系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	章金刚	军事医学科学院野战输血研究所	124	845	15.0	21.0
2	尹惠琼	军事医学科学院野战输血研究所	18	97	7.0	9.0
3	贾俊婷	军事医学科学院野战输血研究所	9	24	3.0	4.0
4	王蕊	军事医学科学院野战输血研究所	8	13	3.0	3.0
5	姬长甫	军事医学科学院野战输血研究所	2	1	1.0	1.0
6	杨姝	军事医学科学院野战输血研究所	6	44	4.0	6.0
7	朱凤宣	军事医学科学院野战输血研究所	2	5	1.0	2.0