沙眼衣原体多形外膜蛋白PmpI的原核表达、纯化、抗体制备及鉴定

• 作者: 刘全忠 刘原君 王生 郑蕾 郭睿 魏世娟
• 来源期刊: 中华皮肤科杂志
• 关键词: 沙眼衣原体 细菌外膜蛋白质类 克隆,分子 多形外膜蛋白
• 年，卷（期）: 2016,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 801-805
• 页数: 5页
• 字数: 4516字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2016.11.010

摘要

目的：克隆、表达沙眼衣原体多形外膜蛋白I（PmpI）基因，并进行免疫原性鉴定，分析其生物学特征。方法用生物信息软件分析沙眼衣原体多形外膜蛋白PmpI的基因序列并预测PmpI蛋白的B细胞抗原表位。以D型沙眼衣原体DNA为模板，PCR扩增PmpI基因N端90~1464碱基序列，构建原核载体进行诱导表达。Ni离子亲合层析柱纯化重组蛋白，制备PmpI多克隆抗体并用Western印迹法检测其免疫原性。结果对蛋白质的二级结构和柔性区、氨基酸的亲水性、抗原指数和表面可及性预测结果综合分析，推测该蛋白含有8个优势B细胞表位。PCR扩增D型沙眼衣原体PmpI基因核苷酸序列长度为1375 bp。成功构建pET28a?PmpI原核表达重组体，经诱导表达、亲和层析纯化后获得了相对分子质量为50000的重组蛋白并制备其多克隆抗体。结论成功克隆并表达了D型沙眼衣原体多形外膜蛋白N?PmpI，为研究该蛋白的生物学功能奠定了一定基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘全忠	300052天津医科大学总医院皮肤性病科	2	3	1.0	1.0
2	郭睿	300052天津医科大学总医院皮肤性病科	1	2	1.0	1.0
3	刘原君	300052天津医科大学总医院皮肤性病科	1	2	1.0	1.0
4	郑蕾	300052天津医科大学总医院皮肤性病科	1	2	1.0	1.0
5	王生	300052天津医科大学总医院皮肤性病科	1	2	1.0	1.0
6	魏世娟	300052天津医科大学总医院皮肤性病科	1	2	1.0	1.0