人胱抑素C的原核表达及活性鉴定

• 作者: 何赛 刘如石 吴意 李原 李桑 蒋琰 郑姣
• 来源期刊: 检验医学与临床
• 关键词: 人胱抑素 C 酶联免疫吸附试验 免疫反应性 免疫原性
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 论 著
• 页码范围: 730-733
• 页数: 4页
• 字数: 4859字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-9455.2016.06.004

摘要

目的：建立胱抑素 C 蛋白（Cys C）原核表达系统，表达、纯化并鉴定重组的人 Cys C 。方法在不改变氨基酸序列的前提下，对 Cys C 的编码基因进行大肠杆菌同义密码子偏好性优化后，人工合成其序列，PCR 扩增Cys C 基因，在原核系统中表达重组人 Cys C 。纯化表达的 Cys C 重组蛋白，采用间接 ELISA 法测定其反应灵敏度及免疫原性。结果十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）鉴定可知，重组基因在大肠杆菌中获得了有效表达，相对分子质量约为35×103，Western blot 结果进一步说明重组蛋白为 Cys C 蛋白，间接 ELISA 结果显示，在包被浓度为0．5 mg／L 时便产生了阳性值。结论成功建立了 Cys C 原核表达系统，Cys C 蛋白作为抗原具有良好的免疫反应性与免疫原性，为制备相应的抗原诊断单克隆抗体打下了基础，同时也为开发 Cys C 快速诊断ELISA 试剂盒提供了可选原料。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘如石	湖南师范大学医学院医学分子与免疫诊断实验室	34	210	8.0	13.0
2	李桑	湖南师范大学生命科学院	3	1	1.0	1.0
3	李原	湖南师范大学第一附属医院检验科	2	3	1.0	1.0
4	何赛	湖南师范大学生命科学院	2	0	0.0	0.0
5	郑姣	湖南师范大学生命科学院	3	0	0.0	0.0
6	吴意	湖南师范大学第一附属医院检验科	3	6	2.0	2.0
7	蒋琰	湖南师范大学第一附属医院检验科	1	0	0.0	0.0