基于全菌消减SELEX技术的体外筛选大肠埃希菌O157∶H7适配体研究

• 作者: 刘伟丽 徐群英 李君文 杨栋 袁兆康 许蕊 谌志强 邱志刚 金敏
• 来源期刊: 环境与健康杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 大肠埃希菌O157∶H7 适配体 全菌消减SELEX技术 特异性
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 59-62,封3
• 分类号: R117
• 语种: 中文
• DOI: 10.16241/j.cnki.1001-5914.2016.01.015

摘要

目的 筛选出能特异性识别大肠埃希菌O157∶H7的单链DNA(ssDNA)适配体并进行鉴定.方法 利用全菌消减SELEX技术,以完整菌体为靶标菌和消减菌,通过体外筛选方法筛选出大肠埃希菌O157∶H7特异性ssDNA适配体.利用荧光分光光度计、激光共聚焦显微镜、克隆测序、Chromas和DNAMAN分析软件,分析适配体的一、二级结构,并对筛选得到的适配体进行特异性鉴定.结果 经过7轮全菌消减SELEX筛选,荧光分光光度计检测结果鉴定第六轮文库富集达到饱和;通过测序分析、荧光分光光度计和激光共聚焦显微镜特异性检测,获得1条与大肠埃希菌O157∶H7特异性结合的适配体Aptamer1.结论 利用全菌消诚SELEX技术成功筛选获得大肠埃希菌O157∶H7特异性ssDNA适配体.