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重组Toll样受体7真核表达质粒的构建及其对髓样树突状细胞免疫功能的影响
重组Toll样受体7真核表达质粒的构建及其对髓样树突状细胞免疫功能的影响
作者:
刘谋荣
吴湘慧
弓莉
曾俊岭
朱玉峰
王元占
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
Toll样受体7
真核细胞
基因表达
树突状细胞
免疫功能
摘要:
目的 构建重组Toll样受体7(Toll-ike receptor 7,TLR7)真核表达质粒,并分析其对髓样树突状细胞(dendriticcell,DC)免疫功能的影响.方法 用C57BL/6小鼠脾细胞制备原代DC,提取DC总RNA,以其逆转录合成的cDNA为模板扩增TLR7基因,克隆至载体pcDNA3.1(+)中,构建真核表达质粒pcDNA3.1-TLR7.经脂质体Lipofeetamine2000将真核表达质粒转染至小鼠DC,经G418筛选阳性克隆.分别采用Real-time PCR及Western blot法检测转染细胞中TLR7基因mRNA转录及蛋白的表达水平;同时采用流式细胞术及细胞因子试剂盒检测转染细胞表面共刺激分子CD80、CD86和MHCⅡ的表达及分泌白细胞介素-6(interleukins-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosisfactor-α,TNF-α)的水平.结果 经PCR及双酶切鉴定证明重组真核表达质粒pcDNA3.1-TLR7构建正确.转染12、24、48及72 h的DC中均可见TLR7基因的转录及蛋白的表达,且48 h时的转录及表达水平最高.转染48 h后,DC表面共刺激因子CD80、CD86和MHCⅡ的表达水平及其分泌IL-6和TNF-α的水平均显著提高(P<0.05).结论 成功建立了重组TLR7真核表达质粒,且其可明显提高DC的免疫功能.
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文献信息
篇名
重组Toll样受体7真核表达质粒的构建及其对髓样树突状细胞免疫功能的影响
来源期刊
中国生物制品学杂志
学科
医学
关键词
Toll样受体7
真核细胞
基因表达
树突状细胞
免疫功能
年,卷(期)
2016,(5)
所属期刊栏目
基础研究
研究方向
页码范围
473-477
页数
分类号
Q782|R392.12
字数
语种
中文
DOI
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
朱玉峰
南方医科大学南方医院实验动物研究中心
15
95
5.0
9.0
2
王元占
南方医科大学南方医院实验动物研究中心
23
115
6.0
10.0
3
弓莉
南方医科大学南方医院实验动物研究中心
12
63
4.0
7.0
7
刘谋荣
南方医科大学南方医院实验动物研究中心
7
80
5.0
7.0
8
吴湘慧
南方医科大学南方医院实验动物研究中心
16
174
8.0
13.0
9
曾俊岭
南方医科大学南方医院实验动物研究中心
8
64
4.0
8.0
传播情况
被引次数趋势
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引文网络
引文网络
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研究主题发展历程
节点文献
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真核细胞
基因表达
树突状细胞
免疫功能
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研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国生物制品学杂志
主办单位:
中华预防医学会
长春生物制品研究所有限责任公司
出版周期:
月刊
ISSN:
1004-5503
CN:
22-1197/Q
开本:
大16开
出版地:
长春市西安大路3456号
邮发代号:
12-128
创刊时间:
1988
语种:
chi
出版文献量(篇)
5980
总下载数(次)
27
总被引数(次)
20856
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