小鼠Toll样受体3基因的克隆及真核表达

• 作者: 史子学 彭丽娜 徐永莉 李力 王晓杜 缪剑华 邱亚峰 邵东华 马志永 魏建超
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 农学
• 关键词: TLR3 NF-κB 基因表达 信号转导
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 94-98
• 分类号: S858.91
• 字数: 3627字
• 语种: 中文

摘要

采用RT-PCR方法从小鼠巨噬细胞中克隆小鼠Toll样受体3(TLR3)基因,基因测序表明获得了小鼠全长TLR3cDNA,构建了真核表达质粒p3XFLAG-CMV-7.1-TLR3.重组质粒转染293T细胞,Western blotting检测蛋白表达,表达蛋白质的相对分子量与预计相符.采用TLR3的阳性刺激物poly(I∶C)刺激重组质粒转染的293T细胞,双荧光素酶报告基因系统检测发现能激活下游转录因子NF-κB的转录活性,并能诱导TLR3下游细胞因子IL-6和TNF-α的表达.小鼠TLR3基因的克隆和表达,为研究TLR3介导的信号通路及其在抗病毒免疫中的作用打下基础.