提取液及固-液分离方法对固态非淀粉多糖酶类活性的影响

• 作者: 廖睿 张宏福 赵峰 齐智利
• 来源期刊: 动物营养学报
• 学科: 农学
• 关键词: 非淀粉多糖酶 提取液 固-液分离 酶活性
• 年，卷（期）: 2016,（10）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 3352-3358
• 页数: 7页
• 分类号: S816
• 字数: 5179字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-267x.2016.10.040

摘要

本试验旨在探讨固态酶制剂评估中酶的适宜提取液及固-液分离方法。采用4×3双因素完全随机设计,其中提取液分别为去离子水、乙酸-乙酸钠缓冲液(0.1 mol/L,pH 5.50)、磷酸盐缓冲液(0.05 mol/L,pH 6.00)和0.9%NaCl溶液；溶液提取后的固-液分离方法分别为不分离、3000 r/min离心3 min和中速滤纸过滤。每个处理5个重复,每个重复设2个平行,测定各个处理下酶的活性,并考察提取液的类型对酶制剂产品(α-半乳糖苷酶除外)溶解离心后溶液中溶质及蛋白质含量的影响。结果表明,磷酸盐缓冲液溶解木聚糖酶后活性最高( P<0.05)；乙酸-乙酸钠缓冲液、磷酸盐缓冲液及0.9%NaCl溶液溶解β-葡聚糖酶后活性相当(P>0.05),且均显著地高于去离子水( P<0.05)；去离子水溶解β-甘露聚糖酶后活性最高,其次为乙酸-乙酸钠缓冲液,两者都显著地高于磷酸盐缓冲液和0.9%NaCl溶液( P<0.05)。提取液类型对α-半乳糖苷酶活性无显著影响(P>0.05)。酶制剂溶解后的固-液分离方法对木聚糖酶的测定活性无显著性影响(P>0.05)；提取液离心或过滤后β-葡聚糖酶活性最高(P<0.05)；提取液离心后β-甘露聚糖酶活性最高( P<0.05)；而提取液不分离时α-半乳糖苷酶的活性最高( P<0.05)。提取液的种类和酶制剂溶解后的固-液分离方法对4种非淀粉多糖酶的测定活性有极显著的交互作用(P<0.01)。乙酸-乙酸钠缓冲液对木聚糖酶制剂的溶解度最大(P<0.05),去离子水和0.9%NaCl溶液均对β-葡聚糖酶及β-甘露聚糖酶制剂的溶解度最大( P<0.05)。然而,乙酸-乙酸钠缓冲液溶解木聚糖酶、β-葡聚糖酶、β-甘露聚糖酶后提取液中蛋白质的含量均最低(P<0.05)。上述结果表明,乙酸-乙酸钠缓冲液溶解4种固态酶制剂可以最有效地将酶蛋白提取出来,α-半乳糖苷酶提取后不宜固液分离,而其他3种酶的提取液适宜进行离心分离。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张宏福	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室	186	2111	25.0	36.0
2	赵峰	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室	52	383	12.0	16.0
3	齐智利	华中农业大学动物科技学院	54	276	9.0	13.0
4	廖睿	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室	3	3	1.0	1.0