人Plk3基因真核表达载体的构建及蛋白表达和定位

• 作者: 付勤 巴根 李妍 杨蕾 沈涛 郭洲洋 郭然 陈之光
• 来源期刊: 解剖科学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: hPlk3 Western blot 绿色荧光蛋白 质粒构建 COS-7细胞
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 原著
• 页码范围: 13-15,19
• 页数: 4页
• 分类号: Q782
• 语种: 中文
• DOI: 10.16695/j.cnki.1006-2947.2017.01.004

摘要

目的 构建hPlk3真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位.方法 提取工具细胞Hela的mRNA,反转录为cDNA.PCR扩增hPlk3基因cDNA全长,并将其亚克隆至pEGFP-C1表达载体中.然后将构建的重组质粒进行酶切和测序鉴定,并转染到工具细胞COS-7中,提取细胞蛋白进行Western blot检测其表达.最后利用激光共聚焦扫描显微镜观察pEGFP-hPlk3在COS-7细胞内的定位.结果 hPlk3基因cDNA全长克隆到了真核表达载体pEGFP-C1中,酶切鉴定片段为1941bp,并测序成功.Western blot检测到了GFP-hPlk3融合蛋白表达,分子量约为98kDa.pEGFP-hPlk3在COS-7细胞中主要定位于细胞质和核周.结论 成功构建了hPlk3基因cDNA全长的真核表达载体,pEGFP-hPtk3蛋白在COS-7细胞中主要定位于细胞质和核周.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李妍		134	553	12.0	18.0
2	付勤		182	1030	16.0	22.0
3	郭然		9	24	2.0	4.0
4	沈涛		27	129	5.0	11.0
5	巴根		20	78	5.0	8.0
6	杨蕾		56	176	8.0	10.0
7	陈之光		19	78	4.0	8.0
8	郭洲洋		3	0	0.0	0.0