人源化抗苏云金芽孢杆菌Cry1Ab毒素单域抗体的筛选及活性鉴定

• 作者: 刘媛 刘贤金 张宵 徐茜茜 梁颖 焦凌霞
• 来源期刊: 中国食品学报
• 关键词: Cry1Ab毒素 单域抗体 噬菌体展示技术 正负筛选 ELISA
• 年，卷（期）: 2017,（10）
• 所属期刊栏目: 分析与检测
• 页码范围: 268-273
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.16429/j.1009-7848.2017.10.036

摘要

以Cry1Ab毒素作为抗原,将扩增后的噬菌体单域抗体库与固相化包被的Cry1Ab毒素特异性结合,利用噬菌体展示技术从人源化噬菌体单域抗体库(DAB)中筛选抗Cry1Ab毒素的单域抗体.采用正负筛选方法,经4轮“吸附-洗脱-扩增”后,富集特异性识别Cry1Ab毒素的噬菌体单域抗体.第4轮筛选得到的单菌落经单克隆ELISA鉴定,获得6株对Cry1Ab毒素具有较强结合活性的阳性单域抗体菌株,经PCR鉴定和DNA测序,均有完整的单域抗体基因片段插入.对6株阳性克隆的氨基酸序列进行比对分析,其序列差异主要存在于单域抗体的CDR区.