蛋白激酶C epsilon信号通路介导褪黑素抗H9C2细胞缺血再灌注损伤的机制研究

• 作者: 于立明 余鹏飞 俞世强 刘振华 张彬 李步潆 梁宏亮 段维勋 翟蒙恩 金振晓 陈正希
• 来源期刊: 中国体外循环杂志
• 关键词: 褪黑素 缺血再灌注损伤 蛋白激酶Cepsilon 氧化应激 凋亡
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 119-124
• 页数: 6页
• 字数: 4239字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13498/j.cnki.chin.j.ecc.2017.02.13

摘要

目的 探讨褪黑素(Mel)在H9C2细胞缺血再灌注损伤过程中的保护作用及其机制,明确蛋白激酶C epsilon(PKCε)信号通路在此过程中的作用.方法 H9C2细胞经Mel(100μmol/L)预处理12 h后,接受模拟缺血再灌注(SIR)损伤(缺血45 min,再灌注4 h),采用CCK-8法和TUNEL法分别检测细胞活力和凋亡率,使用酶活性测定法检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)的释放量,使用Western blot法检测细胞膜PKCε、细胞质PKCε、Bcl-2、Bax、Caspase-3和gp91phox蛋白的表达情况,并使用PKCε特异性阻断剂εV1-2观察PKCε信号通路在这一过程中发挥的作用.结果 经SIR处理后,H9C2细胞活力显著降低,凋亡率明显增加,PKCε膜转位减少,Bcl-2/Bax比例下调,Caspase-3与gp91phox蛋白表达量增加,细胞中MDA含量上升,SOD活力下降.Mel预处理可显著提高SIR处理后H9C2细胞活力,降低细胞凋亡率,促进PKCε膜转位,上调细胞中SOD活性及降低MDA含量,并可降低Caspase-3与gp91phox蛋白表达量.而使用εV1-2阻断PKCε信号通路可逆转Mel的上述保护作用(均P<0.05).结论 Mel可通过激活PKCε保护性信号通路减轻SIR引起的H9C2细胞氧化应激损伤与凋亡.