银杏二萜内酯葡胺注射液通过激活Akt/Nrf2通路抑制缺糖缺氧诱导的SH-SY5Y细胞的氧化应激损伤

• 作者: 丁岗 刘秋 周军 曹亮 王振中 萧伟 许治良 金治全
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 银杏二萜内酯葡胺注射液 氧化应激 蛋白激酶B 细胞内核因子E2相关因子2
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 65-72
• 页数: 8页
• 分类号: R285.5
• 字数: 5546字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2017.01.008

摘要

目的：探讨银杏二萜内酯葡胺注射液（DGMI）抑制缺糖缺氧（OGD）诱导人源性神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）的氧化应激损伤及其机制。方法 SH-SY5Y细胞随机分为正常细胞对照组，OGD模型组， OGD 4 h+DGMI 25 mg·L-1组，OGD 4 h+银杏叶提取物注射液（EGBLI）25 mg·L-1组，OGD 4 h+银杏内酯注射液（LGBI）25 mg·L-1组。药物作用6 h后，CCK-8法检测细胞存活，水溶性四唑盐1（WST-1）显色法法检测SOD活性，荧光探针法（DCFH-DA）检测ROS生成，Western蛋白印迹法检测细胞内血红素加氧酶（HO-1）、醌氧化还原酶（Nqo1）、蛋白激酶B（Akt）、磷酸化Akt（p-Akt）、细胞内核因子E2相关因子2（Nrf2）、磷酸化Nrf2（p-Nrf2）的表达；OGD 4 h+DGMI 25 mg·L-1组加入PI3K抑制剂LY294002（终浓度为0，12.5，25和50μmol·L-1），检测1 h后Akt，p-Akt，Nrf2和p-Nrf2的蛋白表达。结果与正常细胞对照组相比，OGD模型组SH-SY5Y细胞存活和SOD活性降低（P<0.01），ROS含量升高（P<0.01），降低p-Akt，Nrf2， p-Nrf2，HO-1和Nqo1的表达（P<0.01）；与OGD模型组相比，OGD 4 h+药物组作用6 h，细胞存活率和SOD活性显著提高（P<0.01），ROS含量降低（P<0.05，P<0.01），p-Akt，Nrf2，p-Nrf2，HO-1和Nqo1蛋白表达水平提高（P<0.01），且DGMI 25 mg · L-1效果优于EGBLI 25 mg · L-1和LGBI 25 mg · L-1（P<0.05，P<0.01）；相较DGMI组，DGMI和LY294002作用1 h后p-Akt和p-Nrf2的表达被显著抑制（P<0.01），抑制效果呈浓度依赖性。结论 DGMI 25 mg·L-1对OGD诱导的SH-SY5Y细胞具有抗氧化保护作用，其机制可能与激活Akt/Nrf2通路有关。