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人胰岛因子1基因启动子的克隆及活性鉴定
人胰岛因子1基因启动子的克隆及活性鉴定
作者:
周国平
路康
金蕊
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
启动子活性
胰岛因子1
人胚肾细胞
摘要:
目的:克隆含人胰岛因子1 (islet1,ISL1)基因上游启动子序列的质粒并检测其在人胚肾HEK-293细胞中的启动子活性.方法:以HEK-293细胞提取的DNA为模板,PCR扩增ISL1基因启动子区全长1 419 bp片段;酶切后将此片段连接至pGL3-Basic载体,克隆含有ISL1基因启动子片段的重组质粒;以此重组质粒为模板重复上述步骤构建一系列ISL1启动子5'侧翼区截短质粒.将含ISL1启动子序列的重组质粒及其截短质粒转染至人胚肾HEK-293细胞,双荧光素酶报告基因检测各片段的启动子活性,找出启动子最小活性区域,并通过生物信息学方法分析转录因子结合位点.结果:经酶切、测序鉴定,成功构建含有ISL1启动子序列的重组质粒及其截短质粒.与pGL3-Basic空载体相比,含有ISL1启动子序列的重组质粒启动子活性明显增加(P<0.01).ISL1最小活性区域位于转录起始位点-173 bp至-1 bp之间,其中包含OCT-1、MYOD、E2F2等多个转录因子结合位点.结论:人ISL1转录起始点上游1 215 bp区域在HEK-293细胞中具有较强启动子活性.
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文献信息
篇名
人胰岛因子1基因启动子的克隆及活性鉴定
来源期刊
江苏大学学报(医学版)
学科
医学
关键词
启动子活性
胰岛因子1
人胚肾细胞
年,卷(期)
2017,(6)
所属期刊栏目
经验技术交流
研究方向
页码范围
518-521
页数
4页
分类号
R393
字数
3352字
语种
中文
DOI
10.13312/j.issn.1671-7783.y170192
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
周国平
南京医科大学第一附属医院儿科
59
173
7.0
9.0
2
金蕊
南京医科大学第一附属医院儿科
14
20
3.0
4.0
3
路康
南京医科大学第一附属医院儿科
3
0
0.0
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传播情况
被引次数趋势
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引文网络
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参考文献(2)
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2011(2)
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2015(1)
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研究主题发展历程
节点文献
启动子活性
胰岛因子1
人胚肾细胞
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
江苏大学学报(医学版)
主办单位:
江苏大学
出版周期:
双月刊
ISSN:
1671-7783
CN:
32-1669/R
开本:
大16开
出版地:
江苏省镇江市梦溪园巷30号 出版楼5楼
邮发代号:
28-192
创刊时间:
1991
语种:
chi
出版文献量(篇)
4144
总下载数(次)
4
总被引数(次)
12843
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