鱼类病毒性出血性败血症病毒诊断胶体金免疫层析方法的建立

• 作者: 孙明君 孙涛 岳志芹 王群 雷质文 高瑞刚
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 鱼病毒性出血性败血症病毒 胶体金 免疫层析法
• 年，卷（期）: 2017,（12）
• 所属期刊栏目: 技术支撑
• 页码范围: 92-97
• 页数: 6页
• 分类号: S852.65
• 字数: 4087字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.12.026

摘要

为建立一种快速检测鱼类病毒性出血性败血症病毒(Viral haemorrhagic septicaemia virus,VHSV)的胶体金免疫层析方法(GICA),采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,以标记纯化的VHSVG蛋白单克隆抗体(Mab)10A7为捕捉抗体,将纯化的抗VHSVN蛋白的Mab 10EN单克隆抗体和羊抗鼠IgG抗体包被在硝酸纤维素膜上,作为检测带与质控带,经试验条件优化,组装形成胶体金免疫层析试纸条.用本试验研制的胶体金试纸条检测VHSV感染的CHSE细胞培养物.结果显示:在检测线和质控线均呈现红色条带,而健康的CHSE细胞培养物对照仅在质控线呈现红色条带;试纸条检出病毒培养物的病毒量最低限为104.0TCID50;随机挑取3个不同批次的试纸条,对阳性样品和阴性样品进行重复试验,未发现差异.特异性试验表明,该试纸条与传染性造血器官坏死病毒(IHNV)、传染性胰坏死病毒(IPNV)、鲤春病毒血症病毒(SVCV)、牙鲆弹状病毒(HRV)、草鱼呼肠孤病毒(GCRV)无交叉反应.将同一批次的试纸条在4℃条件下保存不同时间后进行检测,发现保存6个月的试纸条仍具有良好的稳定性.本试验研发的胶体金诊断试纸条具有良好的特异性、灵敏性和重复性,在快速辅助检测方面具有推广应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	岳志芹		54	250	9.0	13.0
2	雷质文		34	164	7.0	11.0
3	王群		31	76	4.0	7.0
4	孙明君		16	43	4.0	6.0
5	孙涛		42	116	7.0	8.0
6	高瑞刚		2	2	1.0	1.0