鱼类病毒性出血性败血症病毒基质蛋白的原核表达及其亚细胞定位

• 作者: 张晓华 彭开松 朱若林 杨彩桥 沈娇娇 蒋书东 鲍传和
• 来源期刊: 中国水产科学
• 学科: 农学
• 关键词: 病毒性出血性败血症病毒 基质蛋白 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 214-220
• 页数: 7页
• 分类号: S941
• 字数: 4463字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1118.2019.18096

摘要

为了对鱼类病毒性出血性败血症病毒(viral hemorrhagic septicemia virus,VHSV)基质蛋白(matrix protein,M)进行功能研究,本实验通过PCR扩增了M基因全长序列,将其克隆至原核表达载体pET-32a(+),转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞后进行IPTG诱导表达,将纯化后的重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,采用间接ELISA检测抗体效价,并运用Western blot和间接免疫荧光检测抗体特异性.结果显示,M基因全长为606 bp,IPTG诱导得到的融合蛋白主要以包涵体的形式存在,大小约为36 kD,比预计略小.间接ELISA检测抗体效价大于1:102400,Western blot检测显示该抗体可以特异性识别纯化的融合蛋白和VHSV感染的鲤上皮瘤(epithelioma papulosum cyprini,EPC)细胞中的M蛋白.间接免疫荧光结果显示M蛋白多抗能识别感染VHSV的EPC细胞中的M蛋白,且M蛋白主要定位于细胞质和细胞膜.本研究中M蛋白多克隆抗体的制备将有助于开展M蛋白的功能研究及疾病的免疫学诊断.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	鲍传和	安徽农业大学动物科技学院	51	393	12.0	18.0
2	彭开松	安徽农业大学动物科技学院	57	331	11.0	15.0
3	蒋书东	安徽农业大学动物科技学院	59	210	8.0	11.0
4	张晓华	安徽农业大学动物科技学院	17	79	4.0	8.0
5	朱若林	安徽农业大学动物科技学院	8	20	2.0	4.0
6	杨彩桥	安徽农业大学动物科技学院	2	3	1.0	1.0
7	沈娇娇	安徽农业大学动物科技学院	2	3	1.0	1.0