仿刺参溶菌酶在重组酿酒酵母中的表达

• 作者: 丛丽娜 张齐 李成 沈咪娜 赵钰 车明月 随瑞瑞
• 来源期刊: 大连工业大学学报
• 学科: 工学
• 关键词: 仿刺参 溶菌酶 酿酒酵母 密码子优化 表达
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 食品与生物工程
• 页码范围: 162-167
• 页数: 6页
• 分类号: TS254.1|Q556.2
• 字数: 3335字
• 语种: 中文

摘要

采用酿酒酵母MKP-0表达仿刺参溶菌酶蛋白(AjLys).以质粒pMD18-AjLys为模板,PCR扩增将组氨酸标签His-tag克隆到AjLys基因的N末端,构建克隆载体pMD18-His6-AjLys.根据密码子偏好性,通过定点突变对AjLys蛋白第69、77和95位的3个精氨酸的密码子进行优化,得到克隆载体pMD18-His6-AjLys (Δ69,77,95).经Spe Ⅰ/Bgl Ⅱ酶切,构建重组表达质粒pESC-LEU-His6-AjLys和pESC-LEU-His6-AjLys (Δ69,77,95).基因工程菌pESC-LEU-His6-AjLys (Δ69,77,95)/MKP-0通过半乳糖诱导72 h后,Western Blot检测结果表明其成功表达了AjLys蛋白.抑菌实验结果表明,AjLys蛋白对溶壁微球菌具有一定的抑制作用.本实验成功构建了AjLys的酿酒酵母表达载体,并可在MKP-0细胞中表达了具有活性的AjLys蛋白,为AjLys的生产提供了一种具有可行性的新方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	丛丽娜	大连工业大学生物工程学院	57	255	8.0	14.0
2	李成	大连工业大学生物工程学院	22	36	4.0	5.0
3	随瑞瑞	大连工业大学生物工程学院	2	1	1.0	1.0
4	沈咪娜	大连工业大学生物工程学院	1	1	1.0	1.0
5	赵钰	大连工业大学生物工程学院	2	2	1.0	1.0
6	车明月	大连工业大学生物工程学院	2	3	1.0	1.0
7	张齐	大连工业大学生物工程学院	4	3	1.0	1.0