辣椒轻斑驳病毒cp基因的原核表达及抗血清制备

• 作者: 万晴姣 乙引 李欲轲 洪鲲 郑兴华 龚记熠
• 来源期刊: 植物病理学报
• 学科: 农学
• 关键词: 辣椒轻斑驳病毒 外壳蛋白 原核表达 抗血清
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 细胞生物学、生理学、生物化学、分子生物学
• 页码范围: 598-604
• 页数: 7页
• 分类号: S432.41
• 语种: 中文
• DOI: 10.13926/j.cnki.apps.000108

摘要

辣椒轻斑驳病毒(Pepper mild mottle virus,PMMoV)属于烟草花叶病毒属,是辣椒的重要病毒种类之一.将PMMoV的外壳蛋白(cp)基因克隆至原核表达载体pET32a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,重组PMMoV CP蛋白以可溶形式表达,纯化后获得分子量约35 kDa的融合CP蛋白.以该重组蛋白为抗原免疫新西兰兔制备了PMMoV CP特异性抗血清.Western blot检测结果表明该抗血清与重组CP蛋白发生强烈的免疫反应,间接酶联免疫吸附测定(ID-ELISA)结果显示该抗血清针对重组CP蛋白的效价达1∶25600,针对PMMoV病汁液的效价达1∶4000,检测灵敏度为1∶3 200,且该抗血清不与PMMoV同属或不同属的其它6种病毒汁液发生免疫反应,具有较好的特异性.利用该抗血清对42份田间辣椒病样进行检测,阳性率达38％,与进口商品化试剂盒检测结果一致,说明该抗血清可用于PMMoV的ELISA诊断.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	龚记熠		26	33	4.0	5.0
2	乙引		194	1671	21.0	30.0
3	万晴姣		35	218	9.0	14.0
4	洪鲲		28	116	6.0	9.0
5	郑兴华		2	18	1.0	2.0
6	李欲轲		13	17	2.0	3.0