烟草atp9基因RNAi表达载体的构建及遗传转化

• 作者: 刘栋 刘齐元 吴凌敏 周玮 王建革 聂亚平 谢丽娟 钟思荣 陶瑶
• 来源期刊: 江西农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 烟草 atp9基因 RNAi 表达载体构建 遗传转化
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 作物科学
• 页码范围: 28-36
• 页数: 9页
• 分类号: S572.032
• 字数: 5638字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13836/j.jjau.2017004

摘要

atp9基因是烟草的雄性不育相关基因.为研究atp9基因的功能及其在烟草雄性不育形成中的作用,根据atp9基因全长序列,设计特异性引物,扩增正、反义干扰片段,将长度为239 bp的atp9基因的正、反向干扰片段分别连接到linker片段的两侧,最后插入到植物表达载体pCAMBIA1301中,成功地构建了atp9基因的RNAi表达载体.利用农杆菌介导法将其转化烟草保持系品种中烟90,结果证明atp9基因的RNAi表达载体已整合到中烟90基因组中.经抗性筛选以及分子检测最终获得41株转pCAMBIA1301-atp9-RNAi烟草植株,其中阳性烟草有20株,转化率为48.8％.研究结果为下一步验证atp9基因的功能及其在烟草雄性不育形成中的作用奠定了基础.