一种绿色荧光蛋白标记的骨髓间充质干细胞源性外泌体的构建及鉴定

• 作者: 付媛 任瑞 刘辉 张显芳 易西南 谭晓红 马志健 鲁亚成 黄奎 黄奕弟
• 来源期刊: 神经解剖学杂志
• 关键词: 外泌体 骨髓间充质干细胞 绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 原著
• 页码范围: 167-171
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.16557/j.cnki.1000-7547.2017.02.0010

摘要

目的:构建稳定表达绿色荧光蛋白(GFP)的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem ceils,MSCs),获得GFP标记的MSCs源性的外泌体(exosomes).方法:全基因合成CD63序列,连接到穿梭载体,酶切验证后转染293T细胞,测定病毒滴度后感染MSCs,72 h后用嘌呤霉素筛选稳定表达的细胞.荧光定量PCR检测CD63在MSCs中的表达.取其无血清培养72 h的上清液,获得提取物,经透射电镜和Western Blot验证.结果:提取物为类圆形囊泡,大小约为40～ 100 nm,具有CD63和Alix表达.结论:成功构建携带GFP标记的MSCs源性的外泌体,为研究外泌体在细胞中的摄取及信号传递提供了工具.