牛传染性鼻气管炎病毒gB和gE基因双重荧光定量PCR检测方法的建立

• 作者: 关平原 徐娜 李平安 杨帆 雷宇
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 牛传染性鼻气管炎 gE、gB基因 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2017,（7）
• 所属期刊栏目: 诊断和检测技术
• 页码范围: 556-559
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65
• 字数: 2614字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0425.2017.07.09

摘要

为建立牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)的双重荧光定量PCR检测方法,本研究根据GenBank中登录的IBRV gE和gB基因序列,设计2对特异性引物及TaqMan探针.结果显示,以含有gB、gE基因的重组质粒为模板绘制标准曲线,其相关系数(R2)均为0.999,有良好的线性关系.该方法仅对IBRV检测为阳性,而对牛支原体、牛副流感病毒3型、牛病毒性腹泻病毒、巴氏杆菌、牛、羊布鲁氏菌检测结果均为阴性,表明其特异性强.该方法的敏感度约为2拷贝/μL,重复性试验表明该方法的组内和组间变异系数均小于2％.根据被OIE采纳的作为国际贸易规定的检测该病毒的荧光定量PCR方法与本实验建立的方法分别对30份牛肺样品进行检测,符合率可达81.8％.研究表明所建立的荧光定量PCR检测方法具有快速、敏感、准确等优点,可以用于IBRV的检测.