HIV-1CRF01_AE重组型gp120 V1/V2结构域单克隆抗体的制备与鉴定

• 作者: 吴喜林 吴稚伟 宋红勇 宫祥丹 楚鹰 苏艾荣 陈德燕 高建伟
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1) gp120可变区1/2 单克隆抗体 真核蛋白表达 疫苗
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 抗体工程
• 页码范围: 540-545
• 页数: 6页
• 分类号: Q813.2|R392.11|R446.61
• 字数: 4395字
• 语种: 中文

摘要

目的 真核表达人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1) CRF01_AE重组型gp120蛋白的V1/V2结构域,制备其单克隆抗体并鉴定其抗原反应性.方法 构建pTriEx-3-V1/V2CNE55真核表达载体,在HEK293F细胞中表达V1/V2-His融合蛋白,纯化后作为抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫后的小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,ELISA筛选分泌抗V1/V2重组蛋白单克隆抗体的阳性杂交瘤,对单克隆抗体的特异性、型别以及效价进行鉴定.结果 制备并获得一株稳定分泌抗HIV-1 AE亚型V1/V2结构域单克隆抗体的杂交瘤细胞株,ELISA测定腹水效价高达1:81 000,单克隆抗体类型属于IgG1/κ型.Western blot结果表明该单克隆抗体同样能够识别不同亚型的HIV gp120蛋白.结论 成功制备出抗HIV-1 AE重组型gp120蛋白V1/V2结构域的单克隆抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴喜林	南京大学医学院公共健康医学中心	4	14	3.0	3.0
2	宋红勇	南京大学医学院公共健康医学中心	4	12	3.0	3.0
3	楚鹰	江苏大学附属武进医院中心实验室	6	26	3.0	5.0
4	宫祥丹	南京大学医学院公共健康医学中心	2	5	1.0	2.0
5	高建伟	南京大学医学院公共健康医学中心	1	4	1.0	1.0
6	苏艾荣	南京大学医学院公共健康医学中心	1	4	1.0	1.0
7	陈德燕	南京大学医学院公共健康医学中心	1	4	1.0	1.0
8	吴稚伟		1	4	1.0	1.0