稳定过表达成纤维细胞激活蛋白的 口腔鳞状细胞癌细胞株的构建

• 作者: 吕晓智 赵萌 邵婷如 陈跃川 黄佳欣
• 来源期刊: 华西口腔医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 成纤维细胞激活蛋白 慢病毒载体 过表达 口腔鳞状细胞癌
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 468-472
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3566字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7518/hxkq.2017.05.004

摘要

目的 构建人成纤维细胞激活蛋白(FAP)过表达慢病毒载体,转染口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞株SCC9,构建稳定过表达FAP的OSCC细胞株.方法 采用聚合酶链反应(PCR)技术获得FAP片段,利用基因重组技术构建过表达FAP的慢病毒载体,包埋病毒并收集上清液感染SCC9细胞株,通过流式细胞荧光分选技术(FACS)进行筛选,获得稳定过表达FAP的SCC9细胞株.结果 对阳性克隆进行酶切鉴定和基因测序证明FAP的慢病毒载体构建成功,实时荧光定量PCR和Western blot检测结果证明成功构建稳定过表达FAP的SCC9细胞株.结论 本研究有助于获得纯化FAP蛋白,为进一步研究FAP在OSCC发生发展过程中的机制奠定基础.