口腔鳞状细胞癌稳定过表达蛋白酶体激活因子PA28γ细胞株的构建

• 作者: 曾昕 李敬 王冏珂 辛川
• 来源期刊: 华西口腔医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 口腔鳞状细胞癌 PA28γ 慢病毒 过表达载体 过表达稳转株
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 6-10
• 页数: 5页
• 分类号: Q782
• 字数: 4221字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7518/hxkq.2020.01.002

摘要

目的 构建蛋白酶体激活因子PA28γ过表达的口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞稳转株,并验证其过表达PA28γ的效率.方法 首先采用聚合酶链反应(PCR)克隆PA28γ基因至pLOV.CMV.cherry.2A.EF1a.PuroR慢病毒载体中,采用PCR和DNA测序比对分析进行鉴定;其次采用293T细胞包装病毒;然后采用病毒感染OSCC细胞构建PA28γ稳定过表达细胞株.最后利用免疫印迹技术检测OSCC细胞稳转株中PA28γ表达的水平.结果 DNA测序结果显示成功构建PA28γ过表达慢病毒载体构建;荧光结果显示,PA28γ过表达慢病毒成功感染OSCC细胞,并呈现樱桃红色荧光;免疫印迹结果显示,构建的PA28γ稳定过表达细胞显著提高细胞中PA28γ表达水平.结论 PA28γ过表达慢病毒载体能显著提高细胞中PA28γ蛋白表达水平,为进一步研究PA28γ对OSCC发生发展的影响及其机制提供了稳定的细胞转染载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曾昕	口腔疾病研究国家重点实验室国家口腔疾病临床医学研究中心四川大学华西口腔医院黏膜病科	9	26	3.0	4.0
2	王冏珂	口腔疾病研究国家重点实验室国家口腔疾病临床医学研究中心四川大学华西口腔医院黏膜病科	5	14	3.0	3.0
3	辛川	口腔疾病研究国家重点实验室国家口腔疾病临床医学研究中心四川大学华西口腔医院黏膜病科	1	0	0.0	0.0
4	李敬	口腔疾病研究国家重点实验室国家口腔疾病临床医学研究中心四川大学华西口腔医院黏膜病科	3	0	0.0	0.0