胆固醇7,8位脱氢酶的表达及催化活性研究

• 作者: 张文强 张璟 毛淑红 秦慧民 薛家禄 路福平
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 胆固醇7,8位脱氢酶 S2细胞 酿酒酵母W303-1A 生物转化 7-脱氢胆固醇
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 21-26
• 分类号: Q819
• 语种: 中文
• DOI: 10.13523/j.cb.20170104

摘要

果蝇的neverland基因是胆固醇7,8位脱氢的重要酶基因.为了探究其在胆固醇脱氢反应中的催化机制,将neverland分别克隆至表达载体pIEx-6及pXY212,再转染导入S2细胞并电转化到S.cerevisiae W303-1A中表达.Western blot结果证实NVD蛋白在重组S2细胞及S.cerevisiae W303-1A中实现了表达.胆固醇转化实验经HPLC分析发现,重组S2细胞可以将胆固醇转化为7-脱氢胆固醇,而重组S.cerevisiae W303-1A并不能实现胆固醇的7,8位脱氢.此外,在重组S.cerevisiae W303-1A和S2细胞的破碎液共同转化胆固醇及NVD体外转化实验中也未发现产物7-脱氢胆固醇的生成.实验结果显示,neverland基因在S2细胞中具有生物活性而在S.cerevisiae 中没有生物活性,表明它在胆固醇脱氢时需要其它的伴侣蛋白协助,实验结果为进一步研究其催化机制提供了理论基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	路福平	天津科技大学生物工程学院工业发酵微生物教育部重点实验室	184	1421	20.0	27.0
2	毛淑红	天津科技大学生物工程学院工业发酵微生物教育部重点实验室	12	10	2.0	2.0
3	秦慧民	天津科技大学生物工程学院工业发酵微生物教育部重点实验室	4	1	1.0	1.0
4	薛家禄		5	2	1.0	1.0
5	张璟	天津科技大学生物工程学院工业发酵微生物教育部重点实验室	2	1	1.0	1.0
6	张文强	天津科技大学生物工程学院工业发酵微生物教育部重点实验室	2	1	1.0	1.0