猪种、牛种、羊种、绵羊种布鲁菌多重PCR检测方法的建立及应用

• 作者: 付明哲 何亚鹏 张琪 许信刚
• 来源期刊: 西北农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪种布鲁菌 牛种布鲁菌 羊种布鲁菌 绵羊种布鲁菌 多重PCR
• 年，卷（期）: 2017,（8）
• 页码范围: 1135-1140
• 页数: 6页
• 分类号: S855.1
• 字数: 5340字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7606/j.issn.1004-1389.2017.08.005

摘要

为建立在临床样本能够同时检测猪种、牛种、羊种、绵羊种布鲁菌的多重PCR方法,根据NCBI已收录的布鲁菌全基因,设计并合成4对特异性引物,通过优化多重PCR的反应条件,建立能够同时检测4种布鲁菌的多重PCR诊断方法.特异性试验结果表明,可以从4种布鲁菌以及 4 种细菌混合物中扩增出大小分别为276、494、733和976 bp的特异性条带,对照组的检测结果为阴性;敏感性试验结果表明,对4种病原菌基因组DNA的检出量为猪种32.2 pg、牛种21.3 pg、羊种27.5 pg、绵羊种43.2 pg;人工模拟感染样本检测结果表明,能从混合感染的病料中特异地检测出 4 种病原菌.应用该方法对 200 份临床奶山羊乳样进行检测,结果检出4份阳性.建立的多重PCR方法具有特异性强、敏感度高、稳定性好的特点,可以有效地检测 4 种布鲁菌的感染.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许信刚	西北农林科技大学动物医学院	116	501	10.0	14.0
2	张琪	西北农林科技大学动物医学院	75	218	9.0	11.0
3	付明哲	西北农林科技大学动物医学院	94	346	10.0	14.0
4	何亚鹏	西北农林科技大学动物医学院	20	41	4.0	5.0