Hsa-miR-17基因启动子区PCR扩增及鉴定体系的构建

• 作者: 吴顺芳 王倩 罗凯 贺智敏 贾小婷 黎谢梦丹
• 来源期刊: 现代检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Has-miR-17 基因 PCR 启动子
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 4-7,12
• 页数: 5页
• 分类号: R531.3|R381
• 字数: 4159字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2017.05.002

摘要

目的 建立Has-miR-17编码基因启动子区的PCR扩增及鉴定体系.方法 提取人源细胞系基因组DNA为实验样本,以Has-miR-17编码基因上游启动子区序列为目标序列,行序列特征分析并设计特异PCR扩增及测序引物,利用添加DMSO和使用5'加尾引物的体系优化策略建立Has-miR-17基因启动子区PCR扩增及鉴定体系并行性能评估.同时另以10例人源细胞系为样本初步验证该PCR及鉴定体系的应用效果.结果 经电泳鉴定与测序分析确认在联合使用5'加尾PCR引物和5％DMSO的条件下Has-miR-17基因启动子区PCR扩增及鉴定体系已成功建立,其检测下限达10 ng/μl且特异度好、重复性佳.利用该体系成功实现对10例人源细胞株Has-miR-17基因启动子区的PCR扩增及鉴定.结论 已成功建立Has-miR-17编码基因启动子区的PCR扩增及鉴定体系.