表达anti-CD19-CAR协同沉默PD-1的慢病毒载体重构

• 作者: 刘峰 姜斌 徐明 袁海花 龚玉芳
• 来源期刊: 现代免疫学
• 学科: 医学
• 关键词: 嵌合体抗原 CD19 PD-1 慢病毒 肿瘤
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 287-293
• 页数: 7页
• 分类号: R392.9
• 语种: 中文

摘要

本研究通过PCR方法扩增含EF1a启动子的DNA片段,利用同源重组酶将该DNA片段整合到pGreenPuro-shRNA慢病毒载体CMV启动子下游,获得新的多启动子慢病毒载体pGreenPuro-Dual.同时,在改造的慢病毒载体的CMV启动子下游插入鼠源anti-CD19-CAR片段,并在H1启动子下游EcoRI和BamHI酶切位点之间插入PD-1shRNA片段,重组获得pGreenPuro-Dual/anti-CD19-CAR/shRNA PD-1慢病毒载体,重组质粒与2个辅助质粒共转染HEK293FT细胞包装重组慢病毒颗粒.利用包装病毒感染HEK293T细胞后,荧光观察病毒感染效率,并提取细胞总蛋白Western blotting检测anti-CD19-CAR以及PD-1的表达.结果显示表达anti-CD19-CAR以及shRNA PD-1的重组慢病毒成功感染了HEK293T细胞,鼠源anti-CD19-CAR成功表达,同时PD-1蛋白被有效沉默.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘峰		99	411	11.0	15.0
2	姜斌		51	201	8.0	11.0
3	徐明		8	26	4.0	5.0
4	袁海花		21	53	4.0	7.0
5	龚玉芳		5	23	2.0	4.0