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人S100A8和S100A9原核载体的构建、鉴定及蛋白纯化
人S100A8和S100A9原核载体的构建、鉴定及蛋白纯化
作者:
丁高峰
徐文才
蒋月
郭雷鸣
陆寓非
陈淅涓
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
钙粒蛋白A
钙粒蛋白B
基因表达
摘要:
目的 分别构建人S100A8(hS100A8)和S100A9(hS100A9)的PET-28a原核表达载体,并纯化hS100A8和hS100A9蛋白,为进一步研究hS100A8和hS100A9蛋白的分子生物学功能奠定实验基础.方法 用带酶切位点的引物从hS100A8和hS100A9的真核表达载体扩增hS100A8和hS100A9基因片段,用相同的限制性内切酶双酶切PCR产物和pET-28a质粒.将两者用T4连接酶连接后转化入感受态细胞DH5α,提取质粒进行鉴定.将构建成功的pET28a-hS100A8和pET28a-hS100A9分别转化感受态细胞BL21,诱导蛋白表达,将等量纯化蛋白在一定钙离子浓度下室温孵育30 min,通过SDS-PAGE和Western blot验证异源二聚体是否形成.结果 正确扩增出hS100A8和hS100A9基因,重组质粒pET28a-hS100A8和pET28a-hS100A9构建成功,纯化后在室温孵育后可形成异源二聚体.结论 hS100A8和hS100A9蛋白可以在体外形成异源二聚体,为探讨其生物学作用奠定理论基础.
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文献信息
篇名
人S100A8和S100A9原核载体的构建、鉴定及蛋白纯化
来源期刊
中国医药生物技术
学科
关键词
钙粒蛋白A
钙粒蛋白B
基因表达
年,卷(期)
2017,(6)
所属期刊栏目
论著
研究方向
页码范围
520-525
页数
6页
分类号
字数
4607字
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.1673-713X.2017.06.005
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
郭雷鸣
郑州大学附属肿瘤医院放疗科
7
37
4.0
6.0
2
丁高峰
郑州大学附属肿瘤医院放疗科
5
21
2.0
4.0
3
徐文才
郑州大学附属肿瘤医院放疗科
3
20
2.0
3.0
4
陈淅涓
郑州大学附属肿瘤医院放疗科
13
65
4.0
7.0
5
蒋月
郑州大学附属肿瘤医院放疗科
10
40
4.0
6.0
6
陆寓非
郑州大学附属肿瘤医院放疗科
9
46
4.0
6.0
传播情况
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引文网络
引文网络
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(11)
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研究主题发展历程
节点文献
钙粒蛋白A
钙粒蛋白B
基因表达
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国医药生物技术
主办单位:
中国医药生物技术协会
出版周期:
双月刊
ISSN:
1673-713X
CN:
11-5512/R
开本:
大16开
出版地:
北京市天坛西里1号
邮发代号:
创刊时间:
2006
语种:
chi
出版文献量(篇)
1998
总下载数(次)
2
总被引数(次)
5232
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:
the National Natural Science Foundation of China
官方网址:
http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:
青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:
数理科学
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