北黄海沉积物可培养产蛋白酶细菌分离鉴定

• 作者: 伍朝亚 孟宪刚 张振鹏 曲慧敏 李岩 解志红
• 来源期刊: 微生物学报
• 关键词: 海洋沉积物 产蛋白酶细菌 多样性 丝氨酸蛋白酶 北黄海
• 年，卷（期）: 2017,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1504-1516
• 页数: 13页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.20160452

摘要

[目的]揭示北黄海沉积物中可培养产胞外蛋白酶细菌及蛋白酶多样性,增加人们对北黄海生态系统中产蛋白酶菌多样性的认识,为海洋产蛋白酶微生物的挖掘提供菌群资源.[方法]分别将5个北黄海沉积物样品梯度稀释涂布至酪蛋白明胶筛选平板,选择性分离产蛋白酶细菌;并通过分析基于16S rRNA基因序列的系统发育关系,揭示这些细菌的分类地位和遗传多样性;分别测定胞外蛋白酶活性并对酶活较高的39株菌进行基于苯甲基磺酰氟(PMSF,丝氨酸蛋白酶抑制剂)、邻菲罗啉(o-phenanthroline,O-P,金属蛋白酶抑制剂)、E-64(半胱氨酸蛋白酶抑制剂)和pepstatin A(天冬氨酸蛋白酶抑制剂)4种抑制剂的酶活抑制实验以及所有菌株对3种底物(酪蛋白、明胶、弹性蛋白)的水解能力;分析这些细菌所产胞外蛋白酶的特性及多样性.[结果]从5个北黄海沉积物样品中分离获得66株产蛋白酶细菌,这些菌株隶属于Bacteroidetes、Proteobacteria、Actinobacteria和Firmicutes 4个门的7个属,其中Pseudoalteromonas (69.9％)、Sulfitobacter (12.1％)和Saleg entibacter (10.6％)是优势菌群;沉积物中可培养的产蛋白酶细菌的丰度为104 CFU/g;蛋白酶酶活抑制实验表明所有测定菌株产生的胞外蛋白酶属于丝氨酸蛋白酶和/或金属蛋白酶,仅有少数菌株所产蛋白酶具有半胱氨酸蛋白酶或天冬氨酸蛋白酶活性.[结论]北黄海沉积物中可培养产蛋白酶细菌类群较为丰富,Pseudoalteromonas、Sulfitobacter 和Salegentibacter菌株是优势菌群,测定菌株所产胞外蛋白酶主要是丝氨酸蛋白酶和/或金属蛋白酶.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李岩	中国科学院烟台海岸带研究所	112	676	15.0	19.0
2	孟宪刚	兰州交通大学化学与生物工程学院	35	248	10.0	14.0
3	解志红	中国科学院烟台海岸带研究所	12	14	2.0	3.0
4	伍朝亚	兰州交通大学化学与生物工程学院	2	1	1.0	1.0
8	曲慧敏	中国科学院烟台海岸带研究所	3	16	1.0	3.0
12	张振鹏	中国科学院烟台海岸带研究所	2	4	1.0	2.0