布鲁氏菌GMD重组蛋白表达及对昆明系小鼠的免疫效果研究

• 作者: 姬祥 张辉 徐锦凤 易德武 易继海 王震 陈创夫 马旭升
• 来源期刊: 新疆农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 布鲁氏菌 GMD 重组蛋白 免疫原性 保护力
• 年，卷（期）: 2017,（12）
• 页码范围: 2304-2313
• 页数: 10页
• 分类号: S85
• 字数: 5587字
• 语种: 中文
• DOI: 10.6048/j.issn.1001-4330.2017.12.018

摘要

[目的]对布鲁氏菌GMD蛋白进行生物信息学预测分析和免疫原性研究,并在小鼠模型上评价其免疫效果.[方法]对GMD蛋白进行生物信息学分析,分析预测其结构及功能,采用PCR技术对布鲁氏菌gmd基因进行特异性扩增,与pET-28a表达载体连接后转化至E.coli BL21(DE3)中,通过SDS-PAGE和Western Blot检测目的蛋白的表达及其反应原性,并通过小鼠免疫和攻毒实验评价其免疫原性以及免疫保护力.[结果]生物信息学分析显示,该蛋白无跨膜区结构,有15个抗原决定簇,不存在信号肽,二级结构以α-螺旋为主.并利用Phyre2服务器成功构建了该蛋白的三维模型.SDS-PAGE分析表明获得了约43.7 ku的融合蛋白,Western Blot结果显示该融合蛋白与羊抗布鲁氏菌阳性血清发生特异性反应.间接ELISA结果显示,免疫小鼠7、14、21 d,实验组小鼠均可产生抗体,且随时间增加抗体水平也随之升高.免疫保护力测定结果显示小鼠脾指数和脾脏CFU均低于PBS组.[结论]GMD重组蛋白具有良好的反应原性,其免疫小鼠后可诱导产生高水平的特异性抗体,具有良好的免疫原性;攻毒后能发挥一定免疫保护作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张辉	新疆石河子大学动物科技学院	8	25	2.0	5.0
2	陈创夫	新疆石河子大学生命科	24	169	8.0	12.0
3	王震	新疆石河子大学动物科技学院	4	4	1.0	2.0
4	徐锦凤	新疆石河子大学生命科学学院	2	4	1.0	2.0
5	易德武	新疆石河子大学动物科技学院	2	4	1.0	2.0
6	易继海	新疆石河子大学动物科技学院	1	0	0.0	0.0
7	马旭升	新疆石河子大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
8	姬祥	新疆石河子大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0