Fas cDNA克隆、表达及重组蛋白纯化的研究

• 作者: 何蕊 朱锡华 王希良 赵一博 黄云辉
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Fas 重组蛋白 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2002,（1）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 40-41,52
• 页数: 3页
• 分类号: R392
• 字数: 1906字
• 语种: 中文

摘要

目的:获得高质量及充足的Fas重组蛋白.方法:采用PCR构建表达重组质粒,亲和层析纯化Fas重组蛋白,ELISA检测其免疫学功能.结果:①PCR扩增获得目的片段约470 bp.②Sanger双脱氧链终止法测序表明,该DNA序列仅174位由A→G突变,属于同义突变,与已知的Fas膜外区氨基酸完全一致.③重组质粒经IPTG诱导有一蛋白得以表达,其目的融合蛋白占细菌总蛋白的17.4%,分子量约为34.3 kD.④经Factor Xa切割Fas融合蛋白,纯化获得Fas重组蛋白,Western印迹出现特异性Fas蛋白带,分子量为21.3 kD,与预测结果相吻合.⑤ELISA检测Fas重组蛋白,具有抗体的免疫学活性.结论:成功地表达并纯化了Fas重组蛋白,解决了Fas不易获得的难题,为研究Fas提供了良好的实验材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱锡华	第三军医大学免疫学教研室	50	252	7.0	13.0
2	黄云辉	第三军医大学免疫学教研室	23	73	5.0	6.0
3	王希良		74	365	10.0	15.0
4	何蕊		13	41	3.0	6.0
5	赵一博		1	3	1.0	1.0