甲基莲心碱逆转人结肠癌细胞奥沙利铂耐药的体外研究

• 作者: 尹玲 屈雁玲 曾珊 李易易 申竑 蔡长景 邓甘露 郭操 韩莹 马俊丽
• 来源期刊: 中国普通外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 结肠肿瘤 抗药性,肿瘤 睡莲科 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 325-332
• 页数: 8页
• 分类号: R735.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3978/j.issn.1005-6947.2017.03.009

摘要

目的:探讨甲基莲心碱(Nef)对人结肠癌细胞奥沙利铂(OXA)耐药的逆转作用及机制.方法:采用OXA浓度逐步递增法(2、4、8、12、24、48μmol/L)孵育人结肠癌HCT116细胞诱导构建OXA耐药株HCT116/OXA;检测Nef对HCT116/OXA细胞的细胞毒性,确定Nef的最适作用浓度和时间;分析并比较OXA(IC50浓度)单独处理、Nef(最适作用浓度)单独处理、OXA(IC50浓度)联合Nef(最适作用浓度)处理后,HCT116/OXA细胞的增殖,凋亡情况及凋亡相关蛋白(Bcl-2,Bax,PARP,p-PARP)的表达情况.结果:与亲本HCT116细胞比较,HCT116/OXA细胞较对OXA的耐药性明显增高(IC50:21.00μmol/L vs.112.00μmol/L,P<0.05),耐药指数为5.33.Nef能明显抑制HCT116/OXA的增殖有作用(P<0.05),并呈浓度依赖性,其最适作用浓度、时间分别为5μmol/L、24 h(细胞存活率为90%).与OXA单独处理比较,HCT116/OXA细胞对OXA联合Nef处理的耐受性明显降低(IC50:112.00μmol/L vs.45.47μmol/L,P<0.05),逆转倍数为2.46;Nef单独作用对HCT116/OXA细胞的凋亡影响不明显(P>0.05),但其与OXA联合作用对HCT116/OXA细胞凋亡诱导作用明显强于OXA单独作用(P<0.05);与OXA或Nef单独作用比较,OXA联合Nef作用后,HCT116/OXA细胞抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显下降,Bax、p-PARP等凋亡蛋白表达明显上升(均P<0.05).结论:Nef可逆转HCT116/OXA对OXA的耐药,机制可能与其调节Bcl-2/Bax表达水平,从而与OXA产生协同作用有关.