H5亚型和N6亚型禽流感病毒二重RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 何莹 李孟 罗思思 谢丽基 谢志勤 谢芝勋 邓显文 黄娇玲 黄莉
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 禽流感病毒 H5亚型 N6亚型 二重逆转录-聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1-4
• 页数: 4页
• 分类号: S852.659.5
• 字数: 2988字
• 语种: 中文

摘要

为了建立一种快速、简便的H5亚型、N6亚型禽流感病毒(AIV)的检测方法,根据GenBank中H5亚型、N6亚型AIV的HA和NA基因保守序列,分别设计了2对特异性引物,通过优化条件,建立了H5亚型和N6亚型AIV二重RT-PCR检测方法.特异性试验结果显示,该方法对H5N6亚型AIV特异性扩增出418 bp和251 bp目的片段,对 H5Ny(y≠6)亚型AIV扩增出418 bp目的片段,对 HxN6(x≠5)亚型AIV扩增出251 bp目的片段,对其他亚型和常见的禽病病原体均未扩增出目的片段;敏感性结果显示,该方法对H5亚型和N6亚型最低检测限为1.59×10-5ng/μL.本研究建立的H5亚型和N6亚型AIV检测方法,具有特异性强,灵敏度高的特点,为H5亚型和N6亚型AIV临床检测以及防控提供了有效方法.