GH蛋白诱导鸡原代成肌细胞表达IGF1条件优化

• 作者: 刘满清 安立龙 张丽 张细权 徐海冬 效梅 李婷 王章 聂庆华
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡成肌细胞 生长激素(GH)蛋白 胰岛素样生长因子1(IGF1)表达 条件优化
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 研究资源与技术改进
• 页码范围: 511-516
• 页数: 6页
• 分类号: S813.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2017.03.018

摘要

生长激素(growth hormone,GH)具有促进动物生长发育的作用,其通过内分泌系统与生长激素受体(growth hormone receptor,GHR)结合形成GH-GHR-IGF1信号通路,在组织和器官发育过程中发挥功能.胰岛素样生长因子1 (insulin-like growth factor 1,IGF1)是一种生长调节多肽,对动物的生长发育和生理调节有重要作用.为了确定体外培养条件下GH诱导鸡成肌细胞表达IGF1的最佳添加方式和浓度,本实验通过分离培养鸡(Gallus gallus)原代成肌细胞,研究GH对下游IGF1 mRNA和蛋白质表达的影响.实验选用孵化至11胚龄的鸡胚,在无菌条件下分离其腿肌组织,通过机械法和差速贴壁法分离纯化获得鸡原代成肌细胞.在此基础上,分别在有血清和血清饥饿条件下,在培养液中添加不同浓度的GH (50,100,200和500 ng/mL)诱导培养3h,收获细胞,定量分析IGF1的表达变化.结果表明,体外培养条件下GH可以诱导鸡成肌细胞表达IGF1 mRNA和蛋白质.在相同的GH添加浓度下,IGF1在血清饥饿条件下的表达量高于有血清培养条件.尤其是在200 ng/mL添加浓度下,IGF1表达量极显著高于有血清培养条件.研究结果表明,在血清饥饿培养条件下,200 ng/mL GH能够诱导鸡原代成肌细胞表达IGF1的量达到最高水平.本研究的开展为揭示GH-GHR-IGF1通路调控鸡成肌细胞增殖和分化的机制提供了理论依据,为研究肉鸡骨骼肌发育提供了基本数据和资料.