可溶性Tim-3体外增强免疫应答的作用及机制研究

• 作者: 侯春梅 李葛 王仁喜 王智鼎 窦帅杰 肖鹤 陈国江 韩根成 黎燕
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: Tim-3 融合蛋白 细胞因子类 U937细胞 Jurkat细胞 T淋巴细胞
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 33-37
• 页数: 5页
• 分类号: R392
• 字数: 4608字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2017.01.008

摘要

目的：评价重组人（hTim-3）-Fc融合蛋白在调节免疫应答中的作用及其机制研究。方法分别将重组hTim-3-Fc融合蛋白与人巨噬细胞系 U937细胞、T 淋巴细胞系 Jurkat 细胞及正常人外周血细胞共培养，采用ELISA、实时荧光定量PCR（ RT-PCR）和蛋白质免疫印迹（ Western印迹）方法检测免疫相关细胞因子水平的变化，探讨重组hTim-3-Fc融合蛋白对免疫细胞活性的影响并阐明机制。结果重组hTim-3-Fc融合蛋白可显著提高免疫细胞活性，表现为U937中IL-8分泌水平，Jurkat细胞IL-2分泌水平，以及人外周血中IL-2和IFN-γ分泌水平显著升高；在mRNA水平，发现重组hTim-3-Fc融合蛋白能显著提高上述细胞中Ⅰ型干扰素（包括IFN-α2、IFN-β1）的表达。在分子机制方面，重组hTim-3-Fc融合蛋白可增强T细胞（Jurkat）及巨噬细胞（U937）中stat-1的磷酸化水平。结论制备的重组人Tim-3-Fc融合蛋白在体外能显著增强免疫细胞活性，有望成为免疫抑制性疾病新的免疫干预药物。