抗人Her2抗原羊驼纳米抗体的筛选与鉴定

• 作者: 冯东晓 刘枫 张淑敏 成岩 李大磊 王兰东 韩冰
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: Her2 纳米抗体 噬菌体展示技术 乳腺肿瘤 诊断
• 年，卷（期）: 2017,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 184-189
• 页数: 6页
• 分类号: R737.9
• 字数: 5282字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2017.03.006

摘要

目的 获得靶向人Her2纳米抗体.方法 使用重组人Her2蛋白免疫羊驼,分离免疫后羊驼的淋巴细胞提取总RNA,利用PCR技术扩增羊驼IgG的可变区(VHH)基因片段,构建噬菌体表面展示的纳米抗体文库,采用Her2抗原对文库进行亲和筛选,将筛选到的克隆转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG 诱导表达重组蛋白,镍离子亲和层析柱纯化获得纳米抗体并用ELISA技术和Biacore检测其与抗原Her2的亲和力,采用免疫组化方法检测Her2阳性乳腺癌组织中Her2的表达.结果 第二轮筛选后得到2个抗体H3和H5,ELISA结果显示两者都具有抗原结合活性,其中H5的亲和力达8.106×10-10 mol/L.H5可识别乳腺癌组织中Her2抗原的表达.结论 从Her2免疫的羊驼体内,通过噬菌体展示技术筛选获得了1个具有较高抗原结合活性的抗Her2纳米抗体,可用于乳腺癌的病理诊断.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李大磊		2	2	1.0	1.0
2	王兰东	滨州医学院药学院	2	8	1.0	2.0
3	刘枫		1	0	0.0	0.0
4	成岩		1	0	0.0	0.0
5	韩冰		1	0	0.0	0.0
6	张淑敏	滨州医学院药学院	2	2	1.0	1.0