酵母双杂交系统筛选猪流行性腹泻病毒N蛋白互作的宿主蛋白

• 作者: 于海 单同领 孔宁 左叶雯 李丽薇 李智丽 王忠泽 王蒙 秦翠丽 童光志 童武 郑浩
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪流行性腹泻病毒 酵母双杂交 N蛋白 蛋白互作
• 年，卷（期）: 2017,（11）
• 所属期刊栏目: 免疫学
• 页码范围: 916-921
• 页数: 6页
• 分类号: S852.65
• 字数: 4706字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.201703021

摘要

为了获得猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白与宿主细胞中的互作蛋白,本研究构建PEDV N蛋白基因的重组载体pGBKT7-N,以其作为诱饵质粒,采用酵母双杂交方法,从猪肺泡巨噬细胞(PAM) cDNA文库中筛选出与N蛋白相互作用的蛋白.结果表明,诱饵蛋白在酵母双杂交系统中不存在毒性和自激活作用,而且筛选出6种与N蛋白互作的蛋白,分别为FTH1、LGALS3、CORO1C、SNRPG、KRTAP5-3和ZNF598.其中半乳糖凝集素3 (LGALS3)和小核糖蛋白G(SNRPG)通过回返试验和免疫共沉淀试验证实其与PEDV的N蛋白存在特异性相互作用.本研究为进一步研究PEDVN蛋白的功能及病毒的致病机制奠定了基础.