猪瘟病毒石门株NS3蛋白的原核表达及其抗体检测间接ELISA的建立

• 作者: 华思红 孙永科 杜敏 杨玉艾 樊钰莹 白文顺 陆欣然
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 猪瘟病毒 NS3基因 原核表达 蛋白纯化 间接ELISA
• 年，卷（期）: 2017,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 28-34
• 页数: 7页
• 分类号: S852.651
• 字数: 6376字
• 语种: 中文

摘要

为配合猪瘟新型疫苗的研发,建立了猪瘟病毒NS3蛋白抗体检测间接ELISA,以期达到有效区分新型疫苗免疫猪与自然感染猪(包括常规疫苗接种猪)的目的.以接种猪瘟病毒(CSFV)石门株的PK-15细胞为模板提取总RNA,经特异性PCR扩增获得长度为2 049 bp的CSFV NS3基因,将其克隆至插入了具有自聚集自切割功能短肽的原核表达载体pET-32a(+),在大肠埃希菌Rosetta(DE3)中优化表达CSFV石门株NS3基因.Western blot分析表明重组蛋白NS3具有反应原性.将纯化的重组蛋白NS3作为包被抗原建立检测CSFV NS3抗体的间接ELISA,以美国爱德士(Idexx)猪瘟病毒抗体检测试剂盒抗体检测结果为标准,对502份血清样品进行检测.结果表明,所建立方法的特异性为96.9％,敏感性为89.7％,总符合率为95.8％,为猪瘟新型疫苗的推广应用提供了血清学检测方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨玉艾	云南农业大学动物科学技术学院	44	195	8.0	12.0
2	孙永科	云南农业大学动物科学技术学院	34	142	7.0	10.0
3	白文顺	云南农业大学动物科学技术学院	35	111	6.0	8.0
4	华思红	云南农业大学动物科学技术学院	3	6	1.0	2.0
5	樊钰莹	云南农业大学动物科学技术学院	3	6	1.0	2.0
6	陆欣然	云南农业大学动物科学技术学院	2	7	2.0	2.0
7	杜敏	云南农业大学动物科学技术学院	4	16	2.0	4.0