多重位点特异性PCR鉴别霍山石斛、铁皮石斛与齿瓣石斛药材

• 作者: 李戈 罗宇琴 肖苏萍 蒋超 袁媛 赵润怀 赵玉洋
• 来源期刊: 药学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 霍山石斛 铁皮石斛 齿瓣石斛 多重位点特异性PCR 掺伪鉴别
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 生药学
• 页码范围: 998-1006
• 页数: 9页
• 分类号: R931
• 语种: 中文
• DOI: 10.16438/j.0513-4870.2016-1207

摘要

为建立同时鉴别霍山石斛、铁皮石斛及齿瓣石斛的多重位点特异性PCR法,解决上述石斛属药材真伪掺杂的难题.通过比对石斛药材ITS及trnL-trnF序列,设计引物,建立多重PCR鉴别法,并对不同来源的霍山石斛、铁皮石斛及齿瓣石斛样品进行特异性扩增,根据特异性条带大小进行鉴别.结果在退火温度为61℃、循环数为35时,齿瓣石斛、铁皮石斛和霍山石斛分别可扩出584、397和211 bp的特异性条带.本文所建立的方法对齿瓣石斛和霍山石斛的最低检测限为1.2 ng,铁皮石斛低于0.24 ng,其对铁皮石斛、齿瓣石斛和霍山石斛的混伪检出限分别为1％、1％和5％.表明多重位点特异性PCR法能特异性鉴别霍山石斛、铁皮石斛及齿瓣石斛.