内含NDV核酸的耐核糖核酸酶病毒样颗粒作为荧光定量RT-PCR内标的制备与鉴定

• 作者: 刘鹏义 卢运战 杨金兵 程帮照 诸亚平 赵宏波
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 生物学
• 关键词: 新城疫 耐核糖核酸酶 病毒样颗粒 MS2噬菌体 荧光RT-PCR
• 年，卷（期）: 2017,（6）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 120-124
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3664字
• 语种: 中文

摘要

为制备检测新城疫病毒的实时荧光RT-PCR病毒样颗粒内标,扩增MS2噬菌体的成熟酶蛋白和衣壳蛋白序列,将其定向插入pET32a载体的相应位置,双酶切和PCR鉴定,构建pET32a-MS2重组质粒;根据新城疫病毒实时荧光RT-PCR检测的目标片段,采用化学合成和klenow酶连接技术制备内标片段,将内标片段插入pET32a-MS2重组质粒,构建pET32a-MS2-IC重组质粒,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,经RNase和DNase消化后,采用荧光RT-PCR检测耐核糖核酸酶病毒样颗粒内标的含量.结果表明,制备了高表达量耐核糖核酸酶病毒样颗粒内标,可用于新城疫病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	程帮照		4	1	1.0	1.0
2	卢运战		2	6	1.0	2.0
3	赵宏波		2	2	1.0	1.0
4	刘鹏义		4	2	1.0	1.0
5	杨金兵		1	1	1.0	1.0
6	诸亚平		1	1	1.0	1.0