缺氧缺血新生大鼠神经元自噬基因表达节律及调控机制

• 作者: 屈艺 朱将虎 李世平 母得志 赵凤艳 郑臻
• 来源期刊: 中国当代儿科杂志
• 关键词: 缺氧缺血 自噬 节律基因 Clock Beclin1 LC3 神经元 新生大鼠
• 年，卷（期）: 2017,（8）
• 所属期刊栏目: 论著·实验研究
• 页码范围: 938-944
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.7499/j.issn.1008-8830.2017.08.017

摘要

目的 通过新生大鼠缺氧缺血脑损伤后神经元自噬基因和节律基因的表达,探讨缺氧缺血引起神经损伤的新机制.方法 将12只Sprague-Dawley大鼠随机分为缺氧缺血组和假手术组,每组6只.采用结扎并切断大鼠右侧颈总动脉并给予低氧处理的方法建立体内缺氧缺血脑损伤模型.Western blot检测两组大鼠大脑皮层和海马组织节律蛋白Clock表达情况.体外培养大鼠神经元细胞,随机分为氧糖剥夺(OGD)组和对照组,OGD组加入无糖无血清DMEM培养基模拟细胞缺血状态,并给予低氧处理建立体外缺氧缺血脑损伤模型.采用Western blot检测两组不同时间点自噬相关蛋白Beclin1和LC3,以及节律基因Clock蛋白表达情况.应用siRNA技术抑制神经元Clock蛋白表达后,检测Beclin1和LC3的表达变化.结果 体外培养神经元Beclin1和LC3Ⅱ的表达呈现节律性波动;OGD处理后,体外培养神经元Beclin1和LC3Ⅱ的表达随着时间的延长逐渐升高,不再呈现节律性波动;与假手术组相比,缺氧缺血引起大鼠皮层和海马组织Clock表达降低(P<0.05);体外培养神经元经OGD处理后,Clock表达也较对照组显著降低(P<0.05);与阴性对照组相比,抑制神经元节律基因Clock表达后,自噬相关蛋白Beclin1和LC3Ⅱ的表达均显著下降(P<0.05).结论 缺氧缺血引起神经元Beclin1和LC3Ⅱ表达节律紊乱,其机制可能与Clock参与调控Beclin1和LC3Ⅱ的表达有关.