基于重组质粒制备STR分型阳性参照物

• 作者: 刘毅成 叶健 梁景青 武波 王乐 王峰 白雪 莫晓婷 郭磊 陈曼
• 来源期刊: 中国法医学杂志
• 学科: 政治法律
• 关键词: 法医物证学 短串联重复序列 重组质粒 阳性参照物
• 年，卷（期）: 2017,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 128-132
• 页数: 5页
• 分类号: DF795.2
• 字数: 2404字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13618/j.issn.1001-5728.2017.02.004

摘要

目的 基于重组质粒制备可用于校准法医STR分型的阳性参照物.方法 以常用阳性参照物9948人类基因组DNA STR分型为依据,基于重组质粒构建包含CSF1PO、D7S820、TH01等40个常染色体位点,DYS391、DYS522、DYS385a/b等22个Y染色体位点以及性别判定基因座Amelogenin的STR分型阳性参照物.将重组质粒定量、稀释后等比例混合,分别应用于DNATyper(R) 19、DNATyper(R)24、DNATyper(R)Y、AmpF(R)STR Identifiler(R) Plus以及PowerPlex(R)18D System五种扩增试剂盒.结果 阳性参照物中各重组质粒浓度为0.0 1pg/μL～0.001pg/μL;应用于AmpF￡STR(R) Identifiler(R) Plus PCR扩增试剂盒,基于重组质粒制备的阳性参照物与人类基因组DNA扩增检测结果差异较小;将此阳性参照物分别应用于不同公司、不同STR基因座的四种STR扩增试剂盒,电泳检测图谱显示各基因座基因型完整,分型正确,峰高相当,基因座间均衡性良好.结论 基于重组质粒制备STR分型阳性参照物,是一种可以替代细胞系制备阳性参照物的方法,具有一定的参考价值.基于此方法制备的阳性参照物可适用于市面上常用的STR检验试剂盒,普适性较强,对法医DNA分型检测有一定的实用价值.