抑制Keap1基因对染砷HaCaT细胞Nrf2通路的影响

• 作者: 吴军 李煜 蒙好孝 赵雨欣 郑玉建 陈柔锦
• 来源期刊: 医学动物防制
• 学科: 医学
• 关键词: HaCaT细胞 Keap1 基因抑制 Nrf2通路 基因表达
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 510-514,封4
• 页数: 6页
• 分类号: R329.2+3|R595.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.7629/yxdwfz201705013

摘要

目的 观察无机砷混合物对Keap1抑制HaCaT细胞的活力及形态变化,探讨Keap1抑制及染砷对Nr2通路相关基因表达的影响,探究砷致皮肤早期氧化损伤的机制.方法 培养正常与Keap1抑制HaCaT细胞,将无机砷混合受试物按照LC50的1/100、1/50、1/10分为低、中、高3个不同浓度组,即为2.90 μmol/L、5.80 μmol/L、29.00μmoL/L,以0 μmol/L无机砷混合受试物染毒Keap1抑制HaCaT细胞组为阴性对照组,正常细胞组为空白对照组,于4个时间点(8、24、48、72 h)采用MTT法检测细胞活力,使用实时荧光定量PCR检测Nrf2通路相关基因(Nrt2、Keap1、Bach1及CBP) mRNA表达.结果 随染砷浓度增加,细胞收缩明显,边缘多不规则,脱壁明显.2.90 μmol/L混合砷染毒促进细胞增殖,≥5.80μmol/L混合无机砷染毒抑制细胞增殖.与空白对照组比较,阴性组Nrf2通路相关基因(Bach1,CBP)随时间延长,基因表达持续升高,差异均有统计学意义(F =200.261,P＜0.05).与阴性组比较,2.90μmol/L染砷组24、48 h时Nri2基因表达无差异;Bach1、CBP基因表达均上调,差异均有统计学意义(F =29.015、43.964,P＜0.01).5.80 μmol/L染砷组24h时Nrt2基因表达无差异,Bach1、CBP基因表达均上调;48、72 h时Nrf2、Bach1、CBP基因表达均下调,差异均有统计学意义(F =5.289、29.015、43.964,P＜0.01).29.00 μmol/L染砷组24、48 h时Nrt2、Bach1、CBP基因表达均上调;72h时Nrf2、Bach1、CBP基因表达均下调,差异有统计学意义(F =34.275,P＜0.01).经两两比较,72 h时随染砷浓度逐渐增加,Nrf2、Bach1、CBP基因表达逐渐下调,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 抑制Keap1基因会引起Nrf2持续激活.Bach1和CBP协同调控Nrf2通路可能在砷致氧化应激反应中起调节作用.