非洲猪瘟病毒非结构基因实时荧光LAMP检测方法的建立

• 作者: 刘志玲 杨舒展 林志雄 段喻燕 田纯见 罗琼 陈茹
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 非洲猪瘟病毒 DNA聚合酶 环介导恒温扩增 标准曲线 模拟样品
• 年，卷（期）: 2017,（11）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.3|S858.315.3
• 字数: 3439字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2017.11.001

摘要

为建立非洲猪瘟病毒(ASFV)通用型高通量检测技术,利用高度保守的非结构DNA聚合酶G1211 R基因,制备质粒标准品,建立实时荧光LAMP方法,出现典型的S形核酸扩增曲线,扩增产物具有特异的熔解曲线.G1211R基因质粒标准品在1.81×105拷贝数/μL~1.81×109拷贝数/μL对数值与Ct值之间的线性关系良好.以ASFV E70株病毒核酸为模板,LAMP检测灵敏度达到21 pg,优于荧光定量PCR方法.重复性试验LAMP检测批内和批间变异系数均小于5%.LAMP方法检测ASFV特异性良好,与猪圆环病毒2型、伪狂犬病病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒及昆虫核酸无交叉反应.以ASFV Arm 07株制备各种临床模拟样品,检出阳性率达到17.31%.检测方法的建立,可为非洲猪瘟防控提供新的技术手段,有利于不同基因型毒株检测和出入境快速筛查.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林志雄	广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心	35	164	8.0	10.0
2	陈茹	广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心	25	163	8.0	11.0
3	田纯见	广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心	9	49	5.0	6.0
4	罗琼	广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心	7	48	5.0	6.0
5	刘志玲	广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心	8	36	4.0	6.0
6	杨舒展	广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心	2	8	1.0	2.0
7	段喻燕	广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心	1	8	1.0	1.0