重组慢病毒GV303 Rat IL-33体外转染原代大鼠骨髓间充质干细胞的研究

• 作者: 姚雪雁 李海波 杨薇 许惠卓
• 来源期刊: 国际眼科杂志
• 关键词: IL-33 转染 骨髓间充质干细胞 实验性自动免疫性葡萄膜炎
• 年，卷（期）: 2017,（5）
• 所属期刊栏目: 实验论著
• 页码范围: 841-845
• 页数: 5页
• 字数: 5522字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3980/j.issn.1672-5123.2017.5.09

摘要

目的:探索构建稳定表达IL-33的原代大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)细胞系的方法.方法:体外分离、培养、鉴定大鼠骨髓间充质干细胞,并进行ELISA实验检测转染前IL-33的表达情况.构建GV303 Rat IL-33慢病毒载体,并进行慢病毒的包装.3d后荧光显微镜下观察GFP的表达,分别使用Western blot、ELISA检测转染后的BMSC中IL-33的表达.结果:大鼠BMSC被成功分离并传代,流式细胞术鉴定BMSC可得到CD90、CD29为阳性,CD11b、CD45、CD34为阴性,与之前的文献报道相符.并且BMSC被成功诱导分化为骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞.对转染前的BMSC行ELISA实验检测IL-33的表达,结果为阴性.病毒转染3d后于荧光显微镜下可观察到GFP的表达;ELISA实验检测转染后BMSC中IL-33的表达,结果为阳性;Western blot亦可以检测到IL-33的表达. 结论:应用GV303慢病毒载体可以建立稳定表达IL-33的大鼠BMSC原代细胞系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨薇	中南大学湘雅医院眼科	10	21	3.0	4.0
2	许惠卓	中南大学湘雅医院眼科	24	62	5.0	6.0
3	李海波	中南大学湘雅医院眼科	4	3	1.0	1.0
4	姚雪雁	中南大学湘雅医院眼科	1	1	1.0	1.0