花吊丝竹ISSR反应体系的建立与优化

• 作者: 何天友 徐雯 施成坤 沈露 瞿印权 荣俊冬 郑郁善 陈礼光
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 花吊丝竹 ISSR 反应体系 优化
• 年，卷（期）: 2017,（7）
• 所属期刊栏目: 园艺·林学
• 页码范围: 86-91
• 页数: 6页
• 分类号: S795
• 字数: 4315字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2017.07.015

摘要

建立关于花吊丝竹的ISSR-PCR反应体系,为花吊丝竹种质资源鉴定提供理论基础.采用单因素试验法,对影响PCR扩增效果的Mg2+浓度、dNTPs浓度、Taq DNA聚合酶用量、引物浓度及模板DNA用量等5个PCR反应体系主要成分以及退火温度和循环次数进行分析,并利用建立的优化反应体系和扩增程序对100条候选引物进行筛选.结果表明,适合花吊丝竹的ISSR-PCR反应体系为:20 μL的反应液中含3.0 mmol/L Mg2+、0.20 mmol/L dNTPs、1.25 UTaq DNA聚合酶、0.6 μmol/L引物、10 ng模板DNA、2μL 10×Buffer、8.55 μL ddH2O.扩增程序为:94℃预变性5 min;94℃变性45 s,52.7℃退火30 s,72℃延伸90 s,40个循环;72℃延伸10 min,4℃保存.建立的花吊丝竹的ISSR-PCR反应体系能够扩增出清晰、多态性较高的条带,且筛选出的16条引物具有高度多态性.表明该体系具有较高的稳定性、重现性和适用性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑郁善	福建农林大学林学院	303	2600	26.0	39.0
2	陈礼光	福建农林大学林学院	136	1297	21.0	30.0
3	荣俊冬	福建农林大学林学院	178	835	14.0	19.0
4	何天友	福建农林大学艺术学院园林学院	110	409	10.0	14.0
5	徐雯	福建农林大学林学院	13	35	3.0	4.0
6	瞿印权	福建农林大学林学院	13	34	3.0	4.0
7	施成坤		4	8	2.0	2.0
8	沈露	福建农林大学林学院	3	3	1.0	1.0