绵羊肺炎支原体多抗原表位基因MO-meAg15重组单增李斯特菌的构建及其免疫原性研究

• 作者: 乔军 卢海亭 孟庆玲 彭叶龙 才学鹏 田路路 贡莎莎 陈创夫
• 来源期刊: 西南农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 绵羊肺炎支原体 单增李斯特菌 meAg15基因 同源重组
• 年，卷（期）: 2017,（9）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 2155-2160
• 页数: 6页
• 分类号: S852
• 字数: 3238字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16213/j.cnki.scjas.2017.9.039

摘要

[目的]本文研发了MO重组活疫苗.[方法]利用PCR技术从LM-SB5株基因组中扩增出rli60基因上下游同源片段a、6,从pMD19-T-meAg15中扩增出MO meAg15目的片段,采用重叠延伸PCR(SOE-PCR)技术将扩增得到的3个基因片段融合成ameAg15b,将其克隆测序鉴定.将ameAg15b目的基因亚克隆到pKSV7穿梭载体,构建pKSV7-ameAg15b重组穿梭质粒,将该重组穿梭质粒电转化至LM-SB5感受态细胞,在氯霉素、高温双重压力筛选重组菌LM-Δrli60-ameAg15b.[结果]重组菌PCR鉴定表明,外源基因meAg15定点整合于LM基因组中.遗传稳定性试验表明,meAg15基因可以在LM基因组中稳定存在.SDS-PAGE结果表明,重组菌LM-Δrli60-ameAg15b可表达相对分子量为14.5 kDa的重组蛋白;Western blot分析说明,表达的重组蛋白能与MO阳性血清发生特异性免疫反应.[结论]小鼠免疫试验表明,重组菌LM-Δrli60-ameAg15b菌体可诱导机体产生抗MO特异性抗体,证实该重组菌具有一定的免疫原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	才学鹏	中国农业科学院兰州兽医研究所	141	790	15.0	21.0
2	陈创夫	石河子大学动物科技学院	192	732	14.0	17.0
3	乔军	石河子大学动物科技学院	103	346	8.0	14.0
4	孟庆玲	石河子大学动物科技学院	77	254	7.0	13.0
5	贡莎莎	石河子大学动物科技学院	18	18	2.0	3.0
6	彭叶龙		6	11	2.0	3.0
7	田路路	石河子大学动物科技学院	3	3	1.0	1.0
8	卢海亭	石河子大学动物科技学院	2	6	1.0	2.0